Evaluación de la técnica de ELISA indirecto OPS para Brucella sp. en muestras de leche y sangre de bovinos y caprinos mediante análisis comparativo con tres métodos diagnósticos.

Abstract

La brucelosis es una enfermedad zoonótica de distribución mundial, que ocasiona grandes pérdidas económicas en el sector ganadero, cuyo diagnóstico se realiza mediante pruebas de laboratorio tanto en leche como en suero; dentro de las mismas, el antígeno O presente en el lipopolisacárido de la envoltura celular de Brucella sp. permite aprovechar su potencial diagnóstico, por lo que el objetivo de la presente investigación fue comparar la eficiencia de la técnica de ELISA indirecto OPS en relación con tres métodos diagnósticos comunes (ELISA indirecto IDVET, ELISA indirecto PRIONICS y Fluorescencia Polarizada - FPA). Se recolectaron 200 muestras entre leche y sangre de caprino y 200 muestras entre leche y sangre de bovino, donde el 100% resultaron negativas a la enfermedad por todos los métodos analizados; además se utilizó 95 muestras de suero y leche previamente comprobadas como positivas a Brucella abortus, mediante Rosa de Bengala, ELISA competitivo y Fluorescencia Polarizada. Se utilizó la FPA como prueba estándar, con la cual se comparó la concordancia y fiabilidad de cada prueba, usando el Kappa de Fleiss como análisis estadístico. Se encontró que ELISA indirecto OPS obtuvo el mayor grado de fiabilidad (90,53 %), seguido por ELISA indirecto IDVET (77,89%) y ELISA indirecto PRIONICS (73,68 %) además se obtuvo una especificidad de 93,8% y sensibilidad de 96% para ELISA indirecto IDVET, especificidad de 99,42% y sensibilidad de 98,55% para ELISA indirecto PRIONICS, especificidad de 99,03% y sensibilidad de 99,9% para FPA y especificidad de 100% y sensibilidad de 99% para ELISA indirecto OPS. Y la prueba Kappa de Fleiss, arrojo un p de 0,0000 (P≥ 0.05) por lo que se rechaza la hipótesis nula. Se concluye que la prueba ELISA indirecto OPS es más eficiente que el resto de test del estudio, debido a que esta prueba es semicuantitativa y utiliza tecnología más específica al detectar anticuerpos contra el polisacárido de cadena O de la cadena LPS.

Brucellosis is a worldwide zoonotic disease that causes large economic losses in the livestock sector. This disease is diagnosed through laboratory tests on both milk and serum, within them, the O antigen present in the lipopolysaccharide of the Brucella sp. allows to take advantage of its diagnostic potential. Therefore, this research aims to compare the efficiency of the indirect OPS-ELISA technique in relation to three common diagnostic methods (indirect ELISA - IDVET, indirect ELISA – PRIONICS, and Fluorescence Polarization assay - FPA). Then, 200 samples were collected from goat milk and blood, and 200 samples from bovine milk and blood, 100% tested negative for the disease according to all the methods used. In addition, 95 serum and milk samples, previously verified as positive for Brucella sp., through Rose Bengal, competitive ELISA and Fluorescence Polarization assay were used. FPA was used as a standard test to compare the concordance and reliability of each test, by means of Fleiss's Kappa statistical analysis. It was found that indirect OPS-ELISA technique obtained the highest degree of reliability (90.53%), followed by indirect ELISA - IDVET (77.89%) and indirect ELISA - PRIONICS (73.68%). In addition, a specificity of 93.8% and sensitivity of 96% for indirect ELISA IDVET was obtained, as well as a specificity of 99.42% and sensitivity of 98.55% for indirect ELISA PRIONICS; also, a specificity of 99.03% and sensitivity of 99.9% for FPA was obtained; as well as a specificity of 100% and sensitivity of 99% for indirect OPS-ELISA. Moreover, Fleiss Kappa test yielded a p of 0.0000 (P≥0.05), therefore, a null hypothesis is rejected. It is concluded that the indirect OPS-ELISA test is more efficient than the rest of the tests undertaken because this is a semi-quantitative test and uses more specific technology when detecting antibodies against the O-polysaccharide chain of LPS chain.